Институт биохимии и физиологии микроорганизмов им. Г. К. Скрябина (ИБФМ)
Список авторов организации
Список статей, написанных авторами организации
-
Взаимодействие наночастиц золота, серебра и магния с растительными объектами
Краткое описаниеВ настоящей обзорной статье рассмотрены данные последних лет о взаимодействии растительных объектов с наночастицами благородных металлов (золото и серебро), а также с наночастицами магния, как элемента играющего центральную роль в организации белоксинтезирующего аппарата клетки. Представлена научная информация, посвященная вопросам влияния наночастиц золота и серебра на растения и их возможной фитотоксичности. Показано, что наночастицы магния, как и наночастицы благородных металлов, оказывают разнообразные эффекты на изменение роста и продуктивности растений, что позволяет расширить арсенал биологически активных веществ. Анализируется участие наночастиц магния в криобиологических реакциях закономерного распада РНК растений в условиях сверхнизких температур, что важно не только для развития мировоззренческих представлений о происхождении жизни на Земле, но и в целях создания новых маркеров для анализа биологических особенностей сельскохозяйственных культур на основе исследований магния долгоживущей РНК их зрелых семян. Представленный критический анализ литературных данных, зачастую неполных и противоречивых, приводит к выводу о необходимости скоординированной программы исследований, которая выявила бы корреляции между параметрами частиц, дизайном эксперимента и наблюдаемыми биологическими эффектами
-
Влияние наночастиц золота на прорастание семян озимого ячменя
Краткое описаниеВ статье представлены результаты исследований влияния наночастиц (15 нм и 50 нм) золота (ЗНЧ) на прорастание семян и рост 3-х суточных этиолированных колеоптилей и корней. По сравнению с дистиллированной водой (контроль) исходные коллоидные растворы (57 мкг/мл) ЗНЧ как 15-нм, так и 50-нм не оказывали существенного эффекта на прорастание семян, а также на рост колеоптилей и корней. Однако в обоих случая отмечалась слабая тенденция к стимуляции роста колеоптилей и ингибированию роста корней. Снижение концентрации 15-нм ЗНЧ до 10 мкг/мл и 1 мкг/мл не изменяло роста проростков, но стимулировало прорастание семян в 2 раза. Аналогичные концентрации 50-нм ЗНЧ оказывали стимулирующее действие как на прорастание семян (в 2 раза), так и на рост колеоптилей и корней. Особенно интенсивно росли проростки на коллоидном растворе ЗНЧ с концентрацией Au 10 мкг/мл. Однако повышение температуры на 2 градуса (с 25°С до 27°С) приводило к усилению роста контрольных 3-х суточных проростков и противоположному действию 50-нм ЗНЧ: колеоптили и корни отставали в росте от контрольных проростков на 16-17%. Однако на 4-е сутки при температуре 27°С происходило относительное замедление роста контрольных проростков, и на этом фоне вновь проявлялся эффект стимуляции роста под влиянием 50-нм ЗНЧ. С течением времени стимулирующий эффект 50-нм ЗНЧ снижался: в конце октября он ослабел, а в ноябре – начале декабря отсутствовал для корней, и наблюдалось снижение роста колеоптилей. Однако, во всех случаях сохранялся эффект стимуляции прорастания семян под влиянием 50-нм ЗНЧ, который к декабрю тоже стал слабеть. Выдвигаются гипотезы о молекулярных механизмах биологического действия ЗНЧ
-
Выделение и отбор нетрансдуцирующих бактериофагов E.coli для противоколибактериозных препаратов
Краткое описаниеБыло проведено выделение фагов E.coli из проб природных и сточных вод, полученных во время экспедиций в различных регионах РФ (Краснодарский и Приморский края, Астраханская и Московская области). Полученные фаги (286 изолятов) были исследованы на их способность к литической активности в отношении предварительно сформированной коллекции патогенных штаммов кишечной палочки (Escherichia coli, E. coli) – возбудителей колибактериоза у свиней в Краснодарском крае. Была проведена их молекулярно-генетическая характеризация, оценка их способности к трансдукции, биотехнологические параметры. Впервые для конструирования экспериментальных ветеринарных фаговых препаратов отобрано 5 коли-фагов, демонстрировавших литическую активность в отношении спектра патогенных E.coli, при этом не обладающих способностью к трансдукции плазмид. По результатам ПЦР- анализа было показано, что все исследованные фаги являются представителями фагов Т4-типа семейства Myoviridae, различаясь при этом по спектру генов 32 и hoc. Исследование ростовых свойств фагов показал, что все пять отобранных фагов обладают достаточной продуктивностью для использования в качестве основы конструирования фаговых препаратов, предназначенных для контроля колибактериозов. Исследование выполнено при частичной финансовой поддержке РФФИ в рамках научных проектов 08-04-99111- р_офи, 09-04-10132-к, 16-44-230855р_а
-
Использование бактериофагов для борьбы с колибактериозом и кампилобактериозом в птицеводстве
Краткое описаниеМиниобзор посвящен задачам и методам фаговой терапии двух бактериальных инфекций сельскохозяйственных птиц. В обзоре рассматривается применение бактериофагов от времени их открытия до настоящих дней. Обсуждается актуальность таких заболеваний как кампилобактериоз и колибактериоз, передающихся от птиц к человеку, рассказывается о способах применения бактериофагов и их эффективности на моделях взрослых птиц и цыплят. В том числе приводятся сведения об экспериментальном исследовании фаговой терапии на птицеферме. Исследование выполнено при частичной финансовой поддержке РФФИ по проектам №16- 44-230855-р_а и №13-04-00991а в рамках научного проекта № 16-44-230855-р_а
-
06.00.00 Сельскохозяйственные науки
Краткое описаниеПроведено исследование терапевтического влияния микстуры из четырёх нетрансдуцирующих бактериофагов E. coli, а также их комбинации с пробиотиком на основе эндемичного штамма Lactobacillus paracasei, ранее выделенного от поросят этого возраста местной популяции, на состояние, выживаемость и лабораторные показатели поросят с пост-отъёмным синдромом. Наибольшее влияние на коррекцию динамики E. coli оказывает комбинированное пероральное применение фаговой микстуры и пробиотического препарата. Наибольшее влияние на коррекцию динамики титра коли-фагов оказывает не только комбинированное применение фаговой микстуры (причём как перорально, так и интракутанно) и пробиотического препарата, но и изолированное пероральное применение фаговой микстуры
-
Конструирование мутантов бактериофага Т4 со сниженной антигенностью
Краткое описаниеНа модели бактериофага Т4 исследовали способ получения инсерционных мутантов по гену hoc, кодирующему основной антиген фага. Этот ген, клонированный на плазмиде, был нарушен путем вставки чужеродной ДНК и затем с помощью рекомбинации in vivo получены мутанты фага по типу вставки. Получение мутантов бактериофага по типу вставки проводили в два этапа. На первом этапе получали фаги-интегранты, и фаги- сегреганты получали на втором этапе. Мутанты, полученные в результате этой методики, можно было выращивать на штаммах E.coli дикого типа, что удобно для производства и применения данных фагов в терапии. Полученные мутанты обладали сниженной антигенностью. Вместе с тем они давали хороший урожай при выращивании фагов на бессупрессорных лабораторных штаммах E. Coli. Путем нескольких периодических выращиваний мутантных бактериофагов было показано, что мутации данного типа стабильно поддерживаются более чем в 50 поколениях. Был отработан ряд этапов очистки полученных мутантов бактериофагов. Препараты бактериофагов были исследованы с помощью трансмиссионной электронной микроскопии и масс-спектрометрии белков. Показано, что частичная очистка этих бактериофагов с помощью осаждения полиэтиленгликолем позволяет получить гомогенный препарат годный для дальнейшего изучения и доклинических исследований. Родственные Т4 бактериофаги семейства Myoviridae, например, Т-четные, обладают существенной гомологией геномов, что позволяет получать на их основе опробованным методом аналогичные мутанты. Таким образом, разработан способ получения мутантов со сниженной антигенностью для их применения как при лечении системных инфекций, так диарей, когда возможно попадание бактериофагов в кровяное русло. Подобные фаги могут найти свое применение в медицине и ветеринарии
-
Краткое описание
В данном обзоре рассмотрены этапы конструирования терапевтических фаговых коктейлей бактериофагов T4-типа на основе работ группы исследователей из Nestlé S.A. (Vevey, Vaud, Switzerland) под руководством Гаральда Брюссова (Dr Harald Brüssow) – апологета фаговой терапии. Выделены основные стадии данного процесса: анализ существующих коктейлей, подбор фагов для препарата; создание коллекции; исследования выращивания бактерии-хозяина, размножения вирусов; очистка препарата; проверка контаминации; консервация, стабилизация и хранение; доклинические и клинические испытания. Гаральдом Брюссовым с коллегами на этапе анализа существующих фаговых коктейлей изучен российский препарат “Бактериофаг Коли-протейный” фирмы “Микроген” такими методами как метагеномный анализ, трансмиссионная электронная микроскопия. Ими также проведены клинические исследования данного фагового коктейля. На этапе подбора фагов для препарата профессором Брюссовым рассмотрены преимущества бактериофагов T4-типа для лечения инфекций, вызванных кишечной палочкой. На этапе исследований выращивания бактерии-хозяина, размножения вирусов Гаральдом Брюссовым с коллегами исследованы методы культивирования в больших колбах Эрленмейера, в инженерном биореакторе, в одноразовых мешочных культиваторах. В качестве способов очистки ими были изучены хроматография, центрифугирование и фильтрация, осаждение полиэтиленгликолем. Для быстрой проверки контаминации фаговых коктейлей предложен метод масс-спектрометрии. На этапе стабилизации препаратов Гаральдом Брюссовым были рассмотрены основные стратегии, такие как лиофилизация, распылительная сушка, образование микрокристаллов и микросфер и др. Также профессором с коллегами рассмотрены результаты проведенных клинических исследований фаговых коктейлей. Нами были указаны проблемы отбора штаммов бактериофагов T4-типа с точки зрения современных знаний. Таким образом, Гаральдом Брюссовым с коллегами проведена огромная работа по изучению конструирования фаговых коктейлей на основе бактериофагов T4-типа, а также выявлены проблемы современного состояния фаговой терапии
-
06.02.00 Ветеринария и Зоотехния
Краткое описаниеВ работе мы обнаружили укороченные формы частиц нитчатого бактериофага Pf при индукции лизиса штамма Pseudomonas aeruginosa PAO1 с помощью экстрактов из фекалий зубра для изучения кишечных бактериофагов различных таксономических групп. Были определены размеры укороченных частиц от 250 до 950 нм и их толщина 17 нм. Частицы имели слегка заостренный один конец и иногда флаг на другом расширенном конце. Частицы образовались в лизате данного штамма другими бактериофагами, имеющими отростки. Данные лизаты содержали также высокую концентрацию великул из мембраны псевдомонады. В статье обсуждаются механизмы индукции профага у штамма Pseudomonas aeruginosa PAO1 за счет фаг-фаговой индукции и веществ исследованного эктракта
-
06.00.00 Сельскохозяйственные науки
Краткое описаниеИзучено влияние четырёх экспериментальных препаратов, сконструированных на основе нетрансдуцирующих бактериофагов E. coli, на коли-титр и титр коли-фагов у поросят с пост-отъёмным синдромом в зависимости от способа применения (перорально и интракутанно). Установлено, что при применении фага Т4-типа, имевшего условный лабораторный № 8, титр E. coli корректировался в наибольшей степени (до 5,52 КОЕ/г к 37-дневному возрасту) параллельно с нарастанием титра фагов (до 5,73 БОЕ/г к 40-дневному возрасту). При интракутанном способе введения отдельных экспериментальных фаговых препаратов (на основе фагов № 6 и № 8) наблюдается определённый положительный эффект по коррекции наблюдаемой в контроле отрицательной динамики коли-фагов