Северо-Кавказский зональный НИИ садоводства и виноградарства
Список авторов организации
Список статей, написанных авторами организации
-
Краткое описание
Генетические исследования абрикоса обыкновенного являются актуальным направлением в генетике плодовых культур. В связи с этим пополнение коллекции SSR-маркеров для генотипирования данной культуры является объективно значимой задачей. Была проведена апробация 16 SSR-маркеров, созданных ранее на миндале обыкновенном (PdUnchar2, PdSLD1, PdGMGT1, PdTrTFGT1, PdUnchar2, PdSLD1, PdGMGT1, PdTrTFGT1) и абрикосе сибирском (A3-72, A1-63, H2-22, A3-7-1, H2-5, A1-7, A3-9, H2-45), с целью оценки перспективности их применения для генотипирования сортов абрикоса обыкновенного. Оценка маркеров, проведенная на 3-х сортах различного происхождения, выявила маркеры и их комбинации оптимальные для их применения. В процессе исследования все апробированные SSR-маркеры были объединены в мультиплексные наборы, сформированные из 4 маркеров каждый. Это дает возможность осуществлять генотипирование по 4 маркерам при проведении единичной ПЦР. Один маркер (PdUnchar2) из исследованной выборки включенный в мультиплексный набор не дал амплификации. Пять маркеров дали мономорфный продукт. Остальные 11 SSR маркеров позволили получить полиморфные сортоспецифичные SSR-фингерпринты для всех изученных сортов. Полученные в работе мультиплексные наборы будут применены в исследовательской практике, связанной с изучением полиморфизма сортов абрикоса обыкновенного
-
Модифицированный протокол выделения РНК из зрелых листьев винограда для проведения ОТ-ПЦР
Краткое описаниеВыделение высококачественной РНК из тканей многолетних древесных растений, в том числе и винограда, представляет большую сложность в связи с высоким содержанием фенольных соединений, вторичных метаболитов и полисахаридов и рибонуклеазной активностью разрушенных тканей. Большинство методов требуют больших временных или финансовых затрат, либо не дают воспроизводимого результата в случае работы со зрелыми тканями винограда. Был разработан протокол выделения на основе комбинирования и модификации известных методов экстракции РНК с учетом особенностей зрелых тканей винограда. Коммерческие наборы для выделения РНК из тканей растений показали невысокую эффективность экстракции РНК из зрелых тканей винограда, прежде всего связанную с «сортовой спецификой». Воспроизводимые результаты при экстрагировании РНК показывал CTAB-метод, но он имел ряд недостатков: длительность и сложность обработки препарата РНК ДНК-азой. Разработанный метод основан на повышении концентрации меркаптоэтанола и поливинилпирролидона в экстрагирующем буфере, исключении этапа селективного осаждения РНК LiCl и замене его на осаждение на мембране на основе силики (SiO2) с последующей обработкой ДНК-азой, Данные модификации в два раза сокращают временные затраты на выделение РНК и повышают чистоту препарата РНК от геномной ДНК в сравнении с исходной методикой. Данное решение позволяет получать воспроизводимые количество и качество РНК для последующего синтеза кДНК и RT-PCR
-
Клональное микроразмножение и оздоровление сливы домашней от вируса шарки сливы (PPV)
Краткое описаниеВ статье представлен анализ результатов исследований российских, зарубежных учёных и собственных данных, полученных в области клонального микроразмножения и оздоровления сливы домашней от вируса шарки сливы (PPV). Актуальность работы определяется тем, что слива является второй по значимости культурой в садоводстве юга России. Одним из наиболее экономически значимых объектов вирусной этиологии на сливе домашней считается вирус шарки сливы (Plum pox potyvirus). В Краснодарском крае и в РФ впервые вирус шарки сливы был обнаружен в конце 80-х годов прошлого века, после чего широко распространился в другие регионы страны. В комплексе методов оздоровления от вируса шарки сливы успешно используют термо- и хемотерапию в сочетании с методом апикальных меристем. Механизм образования безвирусных меристем состоит в отставании процесса репликации вирусных частиц от быстрого, опережающего роста зачаточных тканей и органов, особенно, если растение подвергается термо- или хемотерапии. В качестве вироцидов используют препараты НЕО-DHT(85 мг/л), а также салициловую кислоту в концентрации 3х10-4 М при одновременной магнитно-импульсной обработке мериклонов. Наиболее подходящей питательной средой для микроразмножения сливы считается среда Мурасиге-Скуга, на основе которой готовят различные модификации. В качестве ростовых веществ, повышающих эффективность размножения, используется 6-БАП в концентрации 0,5-1 мг/л (на этапе введения в культуру и этапе мультипликации). Для повышения качества микропобегов сливы дополнительно к ростовым веществам рекомендуется применять янтарную кислоту, сукцинаты калия и натрия в концентрации 4 мг/л. Полученные в ходе клонального микроразмножения и адаптированные мериклоны тестируют на вирусоносительство и апробируют по сортовым признакам. Здоровыми сортовыми саженцами закладывают маточники исходных растений
-
Краткое описание
Обзорно-теоретическая статья посвящена рассмотрению гипотетических возможностей разработки молекулярно-кинетических маркеров сельскохозяйственных растений, позволяющих количественно оценивать эффект взаимодействия «генотип-среда» на основе исследований стабильности мРНК. В основу предполагаемой разработки положены результаты исследований тождества распада мРНК in vivo и in vitro (система ommp), а также широко исследуемое у растений явление РНК-интерференции (РНКи). Система ommp позволила установить взаимосвязь сортоспецифической ростовой реакции на действие низких положительных температур, обезвоживания, засоления, освещения и биологически активных веществ со стабильностью суммарной и ряда ген-специфических мРНК зелёных и этиолированных проростков озимой мягкой пшеницы (Triticum aestivum L.) и озимого ячменя (Hordeum vulgare L.). Аналогичные исследования стабильности мРНК были проведены на созревающем зерне кукурузы (Zea mays L.), где, в частности, установлено тождество распада in vivo и in vitro мажорных мРНК запасных белков зеинов 19 и 22 кДа обычной кукурузы и мутантной по регуляторному гену opaque-2, изменяющему количество и стабильность мРНК зеинов в созревающем зерне высоколизиновой кукурузы. Регуляторный ответ организма через РНКи также является множественным и включает в себя нейтрализацию вирусной и бактериальной инфекции, реакцию на патогенны и биологически активные вещества, циркадные ритмы, водный стресс, гипоксию, механический стресс, минеральное питание, солевой стресс и изменение температуры. Неблагоприятные воздействия окружающей среды приводят к повышению или снижению экспрессии определённых микроРНК (миРНК). Изменение стабильности мРНК является важнейшим компонентом системы регуляции экспрессии генов в клетках эукариот. Главные детерминанты стабильности мРНК находятся в 3'-нетранслируемой области. Это последовательность (U)nА и степень полиаденилирования мРНК, т.е. длина её терминальной гомонуклеотидной цепи. Именно к этой области молекулы мРНК комплементарны миРНК. Важнейшим компонентом, в значительной мере определяющий закономерности взаимодействия «генотип-среда», является полиадениловая последовательность на 3'-конце мРНК. Её длина зависит как от генотипа, так и от условий окружающей среды. Есть данные, свидетельствующие о том, что степень полиаденилирования мРНК определяет вторичную структуру молекулы. Как известно, деаденилирование мРНК снижает время её жизни, а при достижении величины поли-А-хвоста в несколько десятков нуклеотидов происходит взрывной распад молекулы мРНК. Следовательно, представляется логичной схема распада мРНК в ивой клетке: укорочение поли-А-хвоста мРНК открывает сайты взаимодействия миРНК с 3'-некодирующей областью молекулы мРНК, что приводит к её деградации. Таким образом, можно предполагать, что в основе разрабатываемых молекулярно-кинетических маркёров лежит процесс взаимодействия мРНК и миРНК в ommp-системе
-
Формирование перспективного сортимента Cupressocyparis Leylandii J. и Thuja L. в условиях юга России
Краткое описаниеВ статье представлены результаты изучения сортов купрессоципариса Лейланда Cupressocyparis Leylandii J. и туи Thuja L. в условиях прикубанской зоны садоводства Краснодарского края по основным адаптивным признакам: зимостойкость, засухоустойчивость, устойчивость к доминирующим болезням и декоративным признакам. Целью исследований являлась выделение наиболее адаптивных и высоко декоративных сортов купрессоципариса и туи в условиях участившихся абиотических и биотических стрессов и формирование адаптивного и перспективного сортимента хвойных растений для озеленения в условиях юга России. Представлены итоги комплексной оценки 6 интродуцированных сортов Cupressocyparis Leylandii J. и 12 сортов Thuja L. Установлены сортовые особенности по признакам адаптивности и декоративности в конкретных условиях возделывания, позволившие выделить сорта, с комплексной устойчивостью к температурным стрессам и основным болезням в сочетании с высокими декоративными признаками (архитектоника кроны, цвет хвои, период декоративности). Это сорта купрессоципариса Лейланда: Leightons Green, Variegata, Gold Rider, и туи Degroots Spire, Mini Smaragd, Atrovirens, Dura, Brabant, Can-Can, показавшие высокую адаптацию к погодно-климатическим условиям южного региона в сочетании с декоративностью, рекомендуемые для расширения сортимента хвойных растений и создания садовых ландшафтов в условиях юга России
-
Совершенствование агротехнологических приёмов в плодовом питомнике
Краткое описаниеАгротехнологические операции, осуществляемые в специализированных питомниках направлены на оптимизацию условий выращивания саженцев. Применение агрохимикатов является одним из наиболее важных технологических вопросов в системе производства. Приём комплексного использования физиологически активных веществ с питательными солями направлен, в первую очередь, на развитие здорового, активно функционирующего ассимиляционного аппарата многолетнего растения, задача которого – сбалансированный рост и формирование репродуктивных органов уже на ранних этапах онтогенеза. В статье представлены результаты работы по внедрению в технологическую схему производства посадочного материала яблони биостимуляторов и удобрений направленного действия. Положительный эффект от введения в схему питательных солей марки N20P8K8+1,5Mg+9S в различных сочетаниях с препаратами: лигногуматом натрия, лигногуматом калия, этан-1,2-дикарбоновой кислотой, природным стимулятором роста «Силк» отразился на уровне обеспеченности растений минеральными элементами, способствовал увеличению на 5,7-10,2 % диаметра штамба; высота саженцев превышала показатель в контроле на 4,9-6,2 %
-
Краткое описание
В настоящей статье приведены результаты апробации IRAP ДНК-маркеров Cass1 и Cass2 применительно к виду Prunus spinosa. Полученные данные позволяют говорить о высокой перспективности их использования для изучения генетического разнообразия генофонда данного вида. По результатам анализа выборки, из 12 генотипов было идентифицировано от 6 до 13 фрагментов в спектре по маркеру Cass1 и от 5 до 11 фрагментов по маркеру Cass2. В результате кластерного анализа в изученной выборке сформировалось три группы образцов. В одну из групп, наиболее удаленную от двух остальных, вошли образцы, отобранные в Украине, в то время как две оставшиеся группы включили образцы из Армении, Краснодарского края, республики Адыгея, Волгоградской области, и три культурные крупноплодные формы. Распределение образцов по кластерам соответствовал их географическому происхождению, что свидетельствует в пользу объективности оценки генетических дистанций между образцами с использованием маркеров Cass1 и Cass2. Сделан вывод о перспективности использования данных ДНК-маркеров для изучения генетического разнообразия вида Prunus spinosa
-
Краткое описание
В ходе работы была проведена оценка 33 ISSR маркеров на эффективность использования в выявлении генетических изменений в регенерантах подснежника Воронова (Galanthus woronowii Losinsk..).Установлено 10 маркеров перспективных для проведения генотипирования по исследуемому виду. По пяти маркерам из отобранных десяти был проведен анализ выборки из 20 растений- регенерантов и маточного растения. Полученные данные свидетельствуют о генетической стабильности растительного материала в процессе микроклонального размножения
-
Стабилизация МРНК злаков in vitro под влиянием кремния
Краткое описаниеВ обзорной статье рассматриваются теоретические и экспериментальные предпосылки участия кремния (Si) в регуляции экспрессии генов злаков на уровне стабильности мРНК. Анализируется гипотетическая возможность стабилизации мРНК in vivo как следствие замены атомов углерода (С) или фосфора (Р) в составе нуклеиновой кислоты на атом кремния. Представлены экспериментальные данные стабилизации мРНК in vitro при её соприкосновении в водном растворе с суспензией целита (SiO2). В экспериментах использовали препараты мРНК из созревающего зерна кукурузы, а также из зелёных и этиолированных проростков яровой пшеницы, различающихся по длине терминальной поли-(А)-последовательности. Обработка целитом исходных прогретых и непрогретых препаратов РНК практически не вносила изменений в стабильность мРНК. Однако по мере укорочения поли-(А)-хостов мРНК целит эффективно стабилизировал как суммарную мРНК, так и ряд индивидуальных, ген-специфических мРНК. Очевидно, по мере укорачивания поли-(А)- хвостов происходит изменение пространственной структуры мРНК и ассоциированные с ней белки и катионы магния (Mg++) становятся доступными для адсорбции целитом. Прогревание, усиливая уже начавшийся процесс расплавления вторичной структуры, способствует повышению эффективности стабилизации мРНК целитом. Интерпретация фактов стабилизации мРНК при взаимодействия целита с мРНК in vitro и под воздействием циклогексимида in vivo, с современной точки зрения может быть конкретизирована с позиции исследований явления РНК-интерференции
-
Краткое описание
Промышленное садоводство предполагает максимально эффективное использование биологического потенциала культивируемых сортов. Одним из ключевых факторов, определяющим урожайность садовых насаждений является эффективность опыления. Для получения максимального урожая необходимо обеспечение полноценного опыления в период цветения. По этой причине вопросу подбора опылителей уделяется большое внимание. Некоторые кребы достаточно перспективны для использования в качестве опылителей для основных промышленных сортов яблони и создания односортных насаждений, поэтому данная работа была направлена на идентификацию наиболее распространенных аллелей гена самонесовместимости у кребов с использованием молекулярно-генетического метода анализа. Объектом исследования послужили 27 кребов и 2 элитные селекционные формы яблони. Выполняли молекулярно-генетическую идентификацию аллелей S2 и S10, которые относятся к числу наиболее распространенных в мировом генофонде яблони. Аллель S2 идентифицировался у 14 образцов (13 кребов и 1 элитной селекционной формы), в то время как аллель S10 у одного образца (элитной формы 12/2- 20-(24-28)). Данные по аллельному составу S-гена у изученных образцов представляют ценность для формирования генетического паспорта по совместимости изученных образцов яблони с современными промышленными сортами